بررسی کارایی ژن‏های تنظیم کننده مسیرهای ترجمه و پس از ترجمه در بهینه‏سازی بیان فاکتور فعال‏کننده پلاسمینوژن بافتی

نویسندگان

اعظم رحیم پور

azam rahimpour school of advanced technologies in medicine, shahidbeheshti university of medical sciences, tehran. iranدانشکده فناوری‏های نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران آزیتا نجایی

azita najaei payame noor university, tehran, iranدانشگاه پیام نور، تهران، ایران فریدون مهبودی

fereidoun mahboudi biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iranمرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران

چکیده

سابقه و هدف: سلول‏های تخمدان همستر چینی (cho)پرکاربردترین سیستم میزبانی برای بیان پروتئین‏های نوترکیب می‏باشند. روش‏های متنوعی هم چون ایجاد وکتورهای بیانی بهینه و نیز میزبان‏های مهندسی شده برای افزایش میزان بیان پروتئین در این میزبان به‏کار گرفته شده‏اند. در این مطالعه روش مهندسی سلول بر پایه ژن‏های موتان غیر قابل فسفریله شونده زیر واحد آلفای فاکتور آغازی یوکاریوتی 2 (eif2α s51a) و پروتئین انتقال دهنده سرامید (cert s132a)، که به ترتیب مسیر‏های ترجمه و ترشح پروتئین را در سلول کنترل می‏کنند، به منظور ایجاد رده سلولی cho بهینه به‏کار گرفته‏ شده است. مواد و روش ها: هر یک از ژن‏های cert s132a، eif2α s51a و فاکتور فعال کننده پلاسمینوژن بافتی  (t-pa) در وکتور بیانی مناسب کلون شدند. جمعیت‏های سلولی پایدار بیان‏کننده هر یک از ژن‏هایcert s132a و eif2α s51a ایجاد شده و کارایی این سلول‏ها در بیان موقتی ژن t-pa در مقایسه با سلول‏های دستورزی نشده مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها: وارد شدن هر یک از ژن‏های cert s132a و eif2α s51a در ژنوم سلول میزبان از طریق انجام pcr بر dna ژنومی سلول‏های پایدار تائید شد. هم چنین در وسترن بلات باند اختصاصی مطابق با هر یک از پروتئین‏های cert s132a و eif2αs51a مشاهده شد. بیان ژن cert s132a افزایش بیان 50% را در بیان t-pa به‏دنبال داشت. در مقابل در سلول‏های پایدار شده با ژن eif2α s51a تاثیر مثبتی بر میزان بیان مشاهده نشد.  نتیجه گیری: نتایج این تحقیق کارایی روش مهندسی سلول بر پایه ژن cert s132a را در ایجاد سلول cho بهینه‏شده نشان می‏دهد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

بررسی کارایی ژن‏های تنظیم‌کننده مسیرهای ترجمه و پس از ترجمه در بهینه‏سازی بیان فاکتور فعال‏کننده پلاسمینوژن بافتی

  سابقه و هدف: سلول‏های تخمدان همستر چینی (CHO)پرکاربردترین سیستم میزبانی برای بیان پروتئین‏های نوترکیب می‏باشند. روش‏های متنوعی هم‌چون ایجاد وکتورهای بیانی بهینه و نیز میزبان‏های مهندسی شده برای افزایش میزان بیان پروتئین در این میزبان به‏کار گرفته شده‏اند. در این مطالعه روش مهندسی سلول بر پایه ژن‏های موتان غیر قابل فسفریله شونده زیر‌واحد آلفای فاکتور آغازی یوکاریوتی 2 (eIF2α S51A) و پروتئ...

متن کامل

مراقبتهای پرستاری دردرمان با فعال کننده پلاسمینوژن بافتی

The main therapeutic objective of emergency after acute myocardial infarction (MI) is limiting the infarcted area through the opening of occluded artery, decreasing demand of myocardial oxygen and preventing MI complications.When arterial wall is injured, the collagen tissue is exposed to platelet aggregation that leads to releasing adenosine 5 diphosphate and subsequent to it, platelet adhesio...

متن کامل

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

متن کامل

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

متن کامل

ترجمه متون و ترجمه زیرنویس: مقابله و بررسی

این پژوهش به بررسی ترجمه کلاسیک و ترجمۀ زیرنویس، تفاوت­ها و شباهت­های میان این دو نوع از ترجمه، و همچنین جذابیت‌های آموزشی روش همانندسازی یا اقتباس می­پردازد. روش همانندسازی، روش قابل استفاده در ترجمۀ زیرنویس است و به علت حضور شخصیت­ها، زندگی و طرح کلی داستان جزو روش­های کاربردی آموزشی­ست که واژگانی مفید و روزمره را به دانشجو و مترجم تازه کار می­آموزد. در جایگاه دوم به بیان تفاوت­های اساسی حرفۀ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
کومش

جلد ۱۷، شماره ۱، صفحات ۱۹۶-۲۰۲

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023